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Vues : 19 Auteur : Éditeur du site Heure de publication : 2023-08-08 Origine : Site
L’ADN, en tant que porteur d’informations génétiques et matériau de base de l’expression génétique, est un papier extrêmement important dans la création, le développement, l’émergence, la génétique et la mutation de l’organisme. Actuellement, il existe de nombreuses méthodes d'analyse pour déterminer l'ADN. Entre eux, la technologie de la sonde fluorescente est un moyen technique important pour surveiller le temps réel au niveau moléculaire avec l'aide des équipements de détection optique à haute sensibilité. de fortes capacités ambiantes ont reçu une attention généralisée et une enquête en analyse biologique. Le fragment d'ADN de marque fluorescente comprend une sonde d'oligonucléotide de cricket fluorescente et une sonde d'ADN de fragment de fragment de marque fluorescente. Au cours des dernières années, l'utilisation de teintes fluorescentes a reçu une grande attention aux marqueurs non radioactifs et a enregistré un développement rapide. Il est également utilisé dans le traitement de la sécurité de l'acide nucléique, des tests génétiques et du diagnostic de la maladie.
Lorsque la lumière ultraviolette ou la lumière visible est irradiée dans un matériau, ces substances émettent une longueur d'onde et une intensité de lumière différentes, et lorsque la lumière ultraviolette ou la lumière visible est déjà allumée, la lumière disparaît également rapidement. Cette lumière est un lama fluorescent.
La longueur de l’onde fluorescente est plus grande que la longueur de l’onde des rayons ultraviolets absorbés. Le processus de fluorescence est simplement réalisé. Dans le processus d'absorption de la lumière, l'énergie de la photo se transfère aux molécules matérielles, les molécules sont stimulées et les molécules sont inestables dans l'inspiration. Le processus est accompagné du lancement de la photo, qui produit de la fluorescence. Certaines substances qui peuvent produire de la fluorescence peuvent être utilisées dans des chromosomes biologiques, et nous appelons des colorants fluorescents (pigment fluorescent) ou des sondes fluorescentes.
L'exposition fluorescente se réfère généralement au processus de réduction de l'intensité fluorescente à travers les effets physiques ou chimiques entre les molécules de fluorescence à travers la dissolution ou les solvants correspondants. Dans ce processus, l'état de base des molécules lumineuses sera défini jusqu'au plus haut point.
L’éclairage fluorescent a généralement deux types : éclairage dynamique et éclairage statique. Ces substances qui peuvent provoquer un enfriamiento fluorescente se appelent agents d'enfriamiento fluorescentes, et l'enfriamiento fluorescente fait que le rendu cuántico fluorescente des sustancias de fluorescencia se réduit considérablement. L'exposition fluorescente se manifeste également dans le cadre des collisions moléculaires d'Husion, de la disparition ou des métastases de votre propre énergie et de l'exposition des forces externes.
L’application de l’oligonucléotide d’alignement fluorescent est le principe de l’hibridation de l’acide nucléique. En réalisant diverses formes d'hibridation avec les molécules objets de l'acide nucléique, et ensuite la technologie de détection de sonde fluorescente pertinente est utilisée pour analyser l'ADN ou l'ARN objet. Dans la méthode d'essai de diagnostic liée à l'application d'oligonucléides, la détection de fluorescence (comme QPCR basée sur des sondes fluorescentes) est un type de technologie extrêmement important. Par exemple, par exemple, certaines applications spécifiques de sécurisation de l'ADN Sanger et d'hibridation in situ (comme des pièces), l'oligonucléotide nécessite une marque unique et la sonde pour la détection fluorescente en temps réel (sonde de l'agent fluorescent du groupe) et la sonde (Beacon Molecular) pour l'identification de gènes iguales fils marcas duales. Inclus si vous utilisez l'agent du groupe base fluorescente, si vous utilisez l'agent dynamique, vous pouvez provoquer un impact dynamique par passage de FRET (transfert d'énergie de résonance fluorescente) ou impact par colision. Le mécanisme de refroidissement est lié au type de sonde. Aux termes généraux, la sonde s'ouvre pour augmenter la distance entre le groupe fluorescent et l'agent d'enfriement pour détecter l'enfriement (balise moléculaire), ou le groupe ou l'agent d'enfriement fluorescent sera le point (Sonda taqman) agrietamiento (plus commun).
1. étiquette de fluorescence
Il existe de nombreuses méthodes pour que l'oligonucléotide étiquette les colorants fluorescents, et le choix de l'étiquette est divers, qui est lié au chlorure de l'anneau d'arôme, qui détermine le lancement de la teinte fluorescente. La fosforamidita de CE de 6 famos, la fosforamidita CE de 6 hexos et la fosforamidita del 6 ce. il est utilisé pour les marques efficaces d'oligucleótido 5'.
Les autres types de monomères subfosforicides qui peuvent être utilisés pour l'oligonucléofluoresceine : 6-fluorescéine-CE fosforamidita et fluoresceína-cosforamidita. Les monómeros comprennent des colorants fluorescents de la même journée fluorescents comme la fosforamidita de 6-FAM CE CE CEC. Diferente esqueleto vinculado. La 6-fluorescéine-CE fosforamidita a une structure de glycol de 1,3, et l'OH est également protégé par le DMTR. De cette manière, on ne peut à lui seul être surveillé au milieu du moniteur de libération du DMTR, même si l'on peut également ajouter plusieurs fois à l'oligonucléotide, que l'on peut utiliser pour le tissu chromosomique. Cependant, cela nécessite généralement un connecteur (comme l'espaceur-18) entre chaque adición pour éviter que la fluoresceína soit en face. La fosforamidita fluorescente-CE proportionne la même possibilité que la fosforamidita de 6 fluoresceína-CE, mais dans ce cas, les articulations sont connectées à la fluorescence à travers les lacets d'azur.
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