Tintas Fluorescentes Utilizadas Para La Oligrafia Etiquetada

O ADN, como portador de informação genética e material base da expressão genética, desempenha um papel extremamente importante no crescimento, no desenvolvimento, no envelhecimento, na genética e na mutação do organismo. Na atualidade, existem muitos métodos de análise para determinar o ADN. Entre eles, a tecnologia da sonda fluorescente é um meio técnico importante para monitorar o monitoramento de tempo real em nível molecular com a ajuda de equipamentos de detecção óptica de alta sensibilidade. de fortes habilidades ambientais receberam atenção generalizada e investigação em análise biológica. O fragmento de ADN fluorescente marcado inclui uma sonda de oligonucleótido fluorescente de críquete e uma sonda de ADN de fragmento de fragmento fluorescente marcado. Nos últimos anos, o uso de cores fluorescentes recebeu muita atenção aos marcadores não radiativos e registrou um desenvolvimento rápido. É usado amplamente na medição da sequência de ácido nucleico, nos testes genéticos e no diagnóstico da doença.

1. O que é fluorescente?

Quando a luz ultravioleta ou a luz visível é irradiada em algum material, essas substâncias emitem a longitude da onda e a intensidade da luz diferente, e quando a luz ultravioleta ou a luz visível deixa de iluminar, esta luz também desaparece rapidamente. Esta luz se chama fluorescente.

A longitude da onda de fluorescência é maior que a longitude da onda dos raios ultravioleta absorvidos. O processo de fluorescência simplesmente está acontecendo. No processo de absorção da luz, a energia da fonte é transferida para as moléculas materiais, as moléculas são estimuladas e as moléculas são inestáveis ​​na inspiração. O processo é acompanhado pelo lançamento da foto, que produz fluorescência. Algumas substâncias que podem produzir fluorescência podem ser usadas em cromossomos biológicos e chamamos corante fluorescente (pigmento fluorescente) ou sonda fluorescente.

Segundo, resfriamento fluorescente

O resfriamento fluorescente geralmente se refere ao processo de redução da intensidade fluorescente através dos efeitos físicos ou químicos entre as moléculas de fluorescência e através do dissolvente ou solventes correspondentes. Neste processo, o estado base das moléculas luminosas será ajustado até certo ponto.

O resfriamento fluorescente geralmente tem dois tipos: resfriamento dinâmico e resfriamento estático. Essas substâncias que podem causar resfriamento fluorescente são chamadas de agentes de resfriamento fluorescentes, e o resfriamento fluorescente faz com que o rendimento líquido fluorescente das substâncias fluorescentes seja reduzido consideravelmente. O resfriamento fluorescente também se manifesta no choque de colisões moleculares de Husion, na destruição ou na metástase de sua própria energia e no resfriamento das forças externas.

Terceiro, a aplicação do oligonucleótido de cordão fluorescente

A aplicação do oligonucleótido de alinhamento fluorescente é o princípio da hibridação do ácido nucleico. Ao realizar diversas formas de hibridação com as moléculas objetivas de ácido nucléico, e além da tecnologia de detecção de sonda fluorescente relevante, ela é utilizada para analisar o objetivo ADN ou ARN. No método de teste de diagnóstico relacionado à aplicação de oligonucleotídeos, a detecção de fluorescência (como QPCR baseada em sondas fluorescentes) é um tipo de tecnologia extremamente importante. Por exemplo, por exemplo, alguns aplicativos específicos de sequenciamento de ADN Sanger e hibridação in situ (como peças), oligonucleótido requerem uma marca única e a sonda para a detecção de fluorescência em tempo real (sonda de agente de grupo fluorescente) e a sonda (Beacon Molecular) para a identificação de genes iguais são marcas duplas. Inclusive se você usar o agente do grupo base fluorescente, se usar o agente dinâmico, poderá ocorrer o resfriamento dinâmico através de FRET (transferência de energia de ressonância fluorescente) ou resfriamento de colisão. O mecanismo de resfriamento está relacionado ao tipo de sonda. Em geral, a sonda se abre para aumentar a distância entre o grupo fluorescente e o agente de resfriamento para deter o resfriamento (baliza molecular), ou o grupo ou agente de resfriamento fluorescente será o ponto ( Sonda taqman) agrietamiento (mais comum).

Quarto grupo fluorescente

1. etiqueta de fluorescência

Existem muitos métodos para que o oligonucleótido etiquete os corantes fluorescentes, e a escolha do rótulo é diversa, que está relacionada com o cloro do anel de aroma, isso determina o lançamento fluorescente do tom. A fosforamidita de CE de 6 famos, a fosforamidita CE de 6 hexos e a fosforamidita de 6 ce. ser utilizado para marcas efetivamente de oligucleótido 5'.

Os outros dois tipos de monômeros de subfosforicidas que podem ser usados ​​para o oligonucleótido de fluoresceína: 6-fluoresceína-CE fosforamidita e fluoresceína-cosforamidita. Ambos os monómeros incluem corantes fluorescentes dos dias fluorescentes, como a fosforamidita de 6-FAM CE CE CEC. Esqueleto diferente. A 6-fluoresceína-CE fosforamidita tem uma estrutura de glicol de 1,3, e o OH adicional é protegido por DMTR. Desta forma, não só pode ser monitorado por meio do monitoramento de liberação de DMTR inclusive, mas também pode ser adicionado várias vezes ao oligonucleotídeo, que pode ser usado para o teor cromossômico. No entanto, geralmente é necessário um conector (como o espaçador-18) entre cada adição para evitar que a fluoresceína entre em contato. A fosforamidita de fluoresceína-CE fornece a mesma possibilidade que a fosforamidita de 6 fluoresceína-CE, mas neste caso, as articulações estão conectadas à fluorescência através de laços de azul.

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