Görüntüleme: 30 Yazar: Site Editörü Yayınlanma Tarihi: 2022-05-10 Kaynak: Alan
Grip sitometrisinin kontrol altına alınması için, cihazın tespit yetenekleriyle örtüşen floresan renklerin ardından gelen ateş uyarısı daha da önemlidir. Floresan renk tonları, enstrüman algılama kanallarının ritminden farklı değil.
Sürekli olarak mevcut olan gribin floresan renkleri aşağıdaki 11 kategoriye ayrılabilir:
1. Moleculas orgánicas pequeñas
Küçük organik moleküller göz önüne alındığında, gencin belediye başkanı kafa karıştırıcı olabilir, ancak bazı başka örnekler de varsa, kesinlikle buna cesaret ederim.
FITC (389 Da), Alexa Fluor 488 (analog FITC, 643 Da), Texas Red (TxRed, 625 Da), Alexa Fluor 647 (1155 Da), Pacific Blue (242 Da) ve Cy5 (242 Da) 762 Da) . Temel olarak kullanılıyor mu?
Bu küçük organik moleküller, sabit bir emisyon spektrumu ve düşük bir Stokes salınımına sahiptir (uyarı ve emisyon boylamları arasında fark, yaklaşık 50-100 nm), ışıkta stabildir ve kullanım şekline göre eski konumlarla kolayca birleştirilir. ampliamente.
Alexa Fluor renk tonlarının FITC'ye göre daha fazla fotoğraflanabilir olduğunu belirtmek isterim, çünkü bir resim elde etmek istiyorsanız, bu seçenek.
2. Fikobiliproteína
Fikobiliproteinler, siyanobakteriler ve dinoflagelados gibi alg ekstra büyük protein molekülleri, örneğin fikoeritrin (PE) 240.000 Da'lık bir moleküle sahiptir. Bu proteinler Stokes'un (75-200 nm) büyük miktardaki yayılmalarına ve kararlı emisyon değerlerine sahiptir. Fikobili koruyucuların çok büyük olmasına bağlı olarak, normalde birleştirme sırasında 1:1 florokrom protein oranı bulunur ve bu da sıvı gribi sitometrisi için faydalıdır.
Ambargo nedeniyle, ficobiliproteínas, açık renkli fotoğrafa karşı hassastır, çünkü pozlamanın uzatılması veya heyecan verici kaynakların tekrarlanması tavsiye edilmez.
Fikri koruyucular ailesinde, koruyucu koruyucular (PE), koruyucu koruyucular (APC) ve Momordica klorofil koruyucuları (PerCP) bulunur.
3. Puntos Cuánticos
Floresan emisyon spektrumlarına sahip nanokristal yarı iletkenler (Qdots) parçacıkları (Qdots), nanokristallerle ilişkili olarak bulunur. Ultraviyole veya menekşe rengiyle çok heyecan verici, ancak çok parametreli deneylerde Qdots kullanıldığında, diğer küçük kantarlarda diğer lazerlerle kolayca uyarılabilir ve karmaşık telafisi zor lazerlerle diğer boylamlarda çok az uyarı elde edilir. floresan.
Buna ek olarak, çok parlak renk tonları nedeniyle, bu reaktifler, telafi sorunları ve bir önceki Qdot'ların zorlukları nedeniyle temel olarak polimerik ve çok parametreli renk tonlarıyla yeniden düzenleniyor.
4. Polimer Renkleri
Makromoleküler renk tonları (polimerler), güneş sinyallerini algılayan polimer zincirlerinden oluşur ve belirli moleküllerin dalga boylamları ve mevcut moleküler alt birimlerin emilimini ve emisyonunu 'sintonize edebilir'. Unidas. Bu renklerin renkleri oldukça sağlamdır ve verimlilik özellikleri, çok iyi bir fotostabiliteye sahip mali koruyuculara benzer.
Renklendirici polimerler, belirli bölgelerdeki tek boylamları absorbe etmek için üretilebildiğinden, Qdots'un ondalık boylamlarla uyarılması sorununu ortadan kaldırır.
Polimerik renklerin tipik temsilcileri parlak menekşe (BV), ultraviyole parlak (BUV) ve mavi parlak (BB) şeklindedir.
5. Birlikte Renkler
Tek başına bir solo oluşturmak için, organik floresan renk tonlarında (Cy3, Cy5, Cy7) biyolojik koruyucu maddeler (PE, APC, PerCP) veya makromoleküler renk tonları (BV421, BUV395) ile eş zamanlı renk tonları ve floresan enerji aktarımı (FRET) kullanılır. Yayılan dünyanın en büyük boylamları heyecanlandırılıyor.
Örnek olarak, Texas Red'in maksimum uyarımı 589 nm'dir ve PE emisyonu 585 nm'ye ulaşırken, PE'nin Texas Red ile birlikte yaptığı gibi, PE emisyonu Texas Red'in FRET'e doğru ilerlemesi, PE-TxRed'in 488 nm'de mevcut olmasıdır. veya 532 nm lazer uyarımı.
Aynı yöntem, organik moleküllerin renkleriyle birlikte eski polimerler için de kullanılabilir.
Renk tonları çok parlaktır ve Stokes'un (150-300 nm) büyük miktardaki yayılma değerlerine sahiptir, bu da çok yoğun antijenleri tespit etmek için kullanılır. Ambargo nedeniyle, florokromların bağışladığı renklendiriciler ve enerji aktarımı verimliliği bir çok farklı gruptan oluşuyor ve bu da telafiyi zorlaştırıyor.
6. Kötü metal iyonları
Floresanla sınırlandırılmayan metal iyonları, ancak su ile ilgili bilgiler de dikkate alınmaz.
Masa sitometrisinde kullanılan antikalar floresanla eşlenmez, çünkü ışık serisinde tek bir izotopta çok sayıda metal iyonu birleşir. Gerçekte, eski bağlamalar için ticari olarak satılan 35 adet lantane izotopu vardır. Bu sondalar floresan değildir ve yalnızca ölçüm verileri için yeterlidir.
7. Floresan protein
Floresan proteinler, genel ifade için bilgilendirici sistem olarak frekansla kullanılır. En çok kullanılan, Victoria Aequorea'nın yeşil floresan proteinidir (GFP). Bu CFP ve YFP'den türetilmiştir.
Floresan floresan proteini (DsRed), Discosoma marka anemondan türetilmiştir ve yaklaşık olarak üretilen monomerik floresan proteinler (mCherry, mBanana) DsRed'den türetilmiştir ve daha yüksek emisyon ve uyarı spektrumlarına sahiptir.
Gen klonlama teknolojisi sayesinde, floresan proteinleri, uyarılma özellikleri ve kızılötesine kadar ultraviyole emisyonu mevcuttur.
8. Çekirdek Asitinin Renkleri
Asit çekirdeklerinin renkleri ARN veya ARN'de aynı değildir. Hücresel döngü analizi için ADN'yi ölçmek için kullanılabilir (p. ej., PI, 7-AAD, DyeCycle Violet, DAPI), kromozomları sınıflandırmak (p. ej., Hoescht 33342, Chromomycin A3), yanal medyan medyan hücre analizini sınıflandırmak (p. ej., Hoescht 33342), Canlılar ve hücreler farklılaşır ve bakteriler sınıflandırılır.
Çoğalma düzeyi, floresan renklendirici (BrdU) ile birleştirilmiş bir anti-bromod oksit oksit gibi asit çekirdeği renklendiricilerinin başka işaretleyicilerle kombinasyonu aracılığıyla belirlenebilir.
9. Hücresel çoğalma renkleri
Hücresel çoğalma, hücresel ADN sentezini içeren BrdU (bromodesoxiuridina) hücreleriyle kuluçkaya yatırılır ve bunlar, BrdU'ya karşı ADN direktörlerinin anti-korozyonları ve renkleriyle birlikte gelişir. Bu yöntem ambargo nedeniyle geniş çapta nükleer silahların yayılmasına yönelik girişimler için uygun değildir.
Karboksifloresan (CFSE) süksinimidil, çoğalmada birden fazla hücre bölünmesini taramak için kullanılabilir. CFSE renklerinin çeşitli renkleri ve moradaları şu anda mevcut. Uygun konsantrasyonlarda, bu renklerin hücresel morfolojiyi veya hücresel çoğalmayı etkilemediği, büyük bir alanda çoğalma çalışmaları için yeterli olduğu belirtiliyor.
10. Hücresel Renkler
Hücresel olarak canlı kalanlar, dışlamanın orta düzey renklerini (örneğin, madde döngüsü, DAPI) veya hücre içi aminlerin orta düzey renklendiricilerini belirleyebilir.
Hariç tutma renkleri yeterli değildir ve yalnızca bulaşıcı olmayan hücreler için uygundur ve hemen bir analiz gerektirir.
Canlı/Ölü (ThermoFisher), Zombi (Biolegend) veya Düzeltilebilir Canlılık (BD Biosciences) dahil olmak üzere renk tonları, hücre içi enfeksiyonlarla, hücre içi antijenlerle birlikte virüs hücreleriyle ve virüs hücreleriyle ilgili olarak uygundur. paraformaldehit.
11. Kireç rengi göstergesi
Kireç göstergelerinin renk tonları, kireç ünitesinde bir renk değişikliği deneyi yapar ve hücresel etkinleştirmeyi ve alarmı belirtmek için kullanılabilir.
Renklendirici daha çok Hint-1'de, yani çift katmanlı UV sondasında kullanılır. Fluo-3 için kireç temizleme sondalarını kullanın.