Etkinleştirme İşlemi Yöntemine Giriş Desen Kodu Enzimi

prensip:

α-amilasa, azar azar azar azar azar azar azar azar azar azar azar azar 1,4 glikozu bağlayarak elma ağacının gövdesinin bir kısmında, farklı boylamlarda bir miktar maltoz ve glikoz içeren, yodo'daki gıdanın reaksiyonunun özel olarak belirlendiği bir moddur. Azul yavaş yavaş azalır ve kademeli olarak maviye dönüştürülür. Rengin bozulma hızı, enzim aktivitesiyle bağlantılı olarak, aktif enzimin mevcut koşullardaki reaksiyondan sonra çözümün absorbsiyonu hesaplanırken hesaplanabilir.

Reaktifler ve Çözümler:

Orijinal Yodo Çözeltisi: 22,0 g potasyum iyot ve yaklaşık 300 ml suda eritilir, 11,0 g iyot eklenir, çalkalanarak çözülür, 500 ml'lik bir hacimde su aktarılır, su ile doldurulur ve bir şişede toplanır. para su uso posterior (bir vez al mes hazırlayın).

Su seyreltme çözümü: 20,0 g potasyum suyu 300 mL suda eritilir, orijinal iyot çözeltisinden 2,00 mL hassasiyetle toplanır, ardından 500 mL'lik bir kovaya aktarılır, su ile doldurulur ve daha sonra kullanılmak üzere bir şişeye konulur (hazırlanır) bir vez al mes).

20 g/L'de çözünür alkali çözelti: 2.000 g çözünebilir alkali çözelti (tabanda), 0,001 g hassasiyette, su ile süspansiyon halinde, 70 mL su ile çalkalanarak ve 30 mL su ile sulandırılır. çeşitli şekillerde Almid içeren küçük bir çökelti kabında, konum eklenir, ısıtılır ve tamamen şeffaf olana kadar 2 dakika bekletilir, ortam sıcaklığına ısıtılır, 100 ml'lik bir mat hacime aktarılır ve su ile seyreltilir. Bu çözüm, günlük düzeni hazırlamanız gerekir.

Fosfat Tamponu (pH=6,0): 45,23 g disodyum fosfat ve 8,07 g asit sitrik asit, suda çözün ve 1000 mL'ye seyreltin. Bazı durumlarda, bir pH ortamıyla kalibre edin.

Asit klorid çözeltisi c(HCl)=0,1mol/L.

Enstrümanlar ve Ekipmanlar:

Spektrofotometre, su banyosu ve sıcaklığı sabit 50°C-100°C, hassasiyet ±0,1°C, boru borusu: 25 mm × 200 mm, yüksek hacimli, otomatik pipet, kronometre.

Analiz için enzim çözümünün hazırlanması:

Enzim sıvısının hazırlanması: enzim aktivitesinin 3,7-5,6 U/mL aralığında olmasını sağlayacak şekilde doğrudan tampon çözümü hazırlayın (bu, uygun bir çoklu seyreltme için aktivite tahminini gerektirir; enzim aktivitesi uygun değilse) bu temizdir, tekrarlanması muhtemeldir).

- Ensayo:

1. 20,0 ml çözünebilir alüminyum çözeltisini ve 5,0 ml çözelti tamponunu bir test tüpüne pipetleyin ve ön takvime tabi tutun ve 5 dakika boyunca 60 °C sıcaklıkta sabit bir su banyosunda dengeleyin.

2. Analiz sonucu elde edilecek enzim çözeltisinden 1,00 ml seyreltin, süreyi anında bir kronometreye kaydedin, iki kez karıştırın ve 5 dakika boyunca hassas bir şekilde tepki verin.

3. Hemen bir pipetle 1,00 mL reaksiyon çözeltisi ekleyin, 0,5 mL önceden doldurulmuş bir tüpte 0,1 mol/L asitli klorlu çözelti ile 5,00 mL seyreltilmiş çözelti dökün ve iki kez karıştırın.

4. 0,5 mL'lik 0,1 mol/L klorhidrik asit ve 5,00 mL'lik iyot çözeltisini beyaz reaksiyonla seyreltin ve 10 mm'lik bir küp ve 660 nm uzunluğunda bir hızla absorbansı (A) kullanın. Alımı gerçekleştirmek için Ek A'ya bakın (QB-T 1803-93 tarihli standartta kayıtlı) ve enzim çözümü konsantrasyonunu (C) elde edin.

Enzim aktivitesinin tanımı:

1 mL enzim sıvısı, 60°C'de 1 saat çözünür, pH=6,0, U/mL olarak ifade edilen bir enzim aktif enzim birimidir.

hesaplayıcı:

X=C×n, X: sinyalin aktif enzimi, C: enzimin konsantrasyonu, n: ekranın seyreltme faktörü. Elde edilen sonuçlar enteresan rakamlarla ifade edilir.

Sonuçların toleransı:

Deneylerle paralel olarak göreceli hata %2'den fazla değil.