Einführung in die Methode zur Prüfung der aktivierten Enzyme zur Entsenkung

Prinzip:

Die α-Amilase kann die Glukosekonzentration α-1,4 in der Kette der Mandel und der rechten Hand der Kette, eine kleine Menge Maltosa und Glukose auf verschiedenen Längengraden, auf die Art und Weise, wie die spezifische Reaktion der Mandel auf blau-schwarzes Wasser, ausgleichen. Das Blau nimmt nach und nach ab und verwandelt sich allmählich in ein braunes Rosa. Die Geschwindigkeit, mit der sich die Farbe löst, hängt von der Enzymaktivität ab, da die Enzymaktivität nach der Reaktion unter den aktuellen Bedingungen die Absorptionsfähigkeit der Lösung berechnen kann.

Reaktionen und Lösungen:

Original-Jodlösung: 22,0 g Kaliumjoghurt und in ca. 300 ml Wasser auflösen, 11,0 g Jodo hinzufügen, unter Rühren auflösen, in eine 500-ml-Volumenmatte umfüllen, mit Wasser auffüllen und in eine Flasche geben marrón para su uso posterior (vorbereitet una vez al mes).

Joghurt-Verdünnungslösung: 20,0 g Kaliumjoghurt und Lösungsmittel in 300 ml Wasser, mit 2,00 ml der Original-Jodlösung auffüllen, auf eine vorbereitete 500-ml-Matratze übertragen, mit Wasser auffüllen und in eine braune Flasche füllen uso posterior (einmal am nächsten Morgen vorbereiten).

20 g/L lösliche Mandellösung: 2.000 g lösliche Mandellösung (auf Basis von Sekunden), mit einer Genauigkeit von 0,001 g, mit einer Suspension von 70 ml Wasser unter Rühren aufhängen und mit 30 ml Wasser auffüllen Wechsel des Wassers In einem Gefäß mit Niederschlägen, das nur halbiert ist, den Standort einbauen, erhitzen und 2 Minuten lang stehen lassen, bis es vollständig transparent ist, auf Raumtemperatur bringen, auf eine 100-ml-Volumenmatte übertragen und mit Wasser verdünnen verärgern. Diese Lösung muss für den nächsten Tag vorbereitet werden.

Phosphorzusatz (pH=6,0): 45,23 g Phosphorsäure und 8,07 g Zitronensäure, in Wasser auflösen und auf 1000 ml verdünnen. Nach der Mezclar-Methode verfügt das Kaliber über einen pH-Wert-Mittelwert.

Chlorwasserstoffsäurelösung c(HCl)=0,1 mol/L.

Instrumente und Ausrüstung:

Spektralfotometer, Wasserbad mit konstanter Temperatur von 50 ℃-100 ℃, Genauigkeit ±0,1 ℃, Messrohr: 25 mm × 200 mm, volumetrisches Messgerät, automatische Pipette, Cronometer.

Vorbereitung der enzymatischen Lösung für einen Test:

Vorbereitung der Enzymflüssigkeit: Bereiten Sie sie direkt mit der Lösung eines Tampons vor, wobei die Aktivität des verdünnten Enzyms im Bereich von 3,7-5,6 U/ml liegt (dies erfordert eine Schätzung der Enzymaktivität, um sie mit einem geeigneten Mehrfachverdünner zu verdünnen; wenn die Enzymaktivität vorliegt). Das ist nicht klar, es ist wahrscheinlich, dass es sich wiederholt.

Ensayo:

1. Pipettieren Sie 20,0 ml Lösung aus leicht löslichem Wasser und 5,0 ml Lösung aus einem Tampon in einer Testtube und stellen Sie sie 5 Minuten lang in einem Wasserbad bei einer konstanten Temperatur von 60 °C ins Gleichgewicht.

2. Geben Sie 1,00 ml der verdünnten Enzymlösung hinzu, die Sie analysieren möchten, messen Sie die Zeit sofort mit einem Messgerät, rühren Sie gut um und reagieren Sie 5 Minuten lang präzise.

3. Geben Sie sofort 1,00 ml der Reaktionslösung mit einer Pipette hinzu, kalibrieren Sie sie in einem vorgeladenen Behälter mit 0,5 ml 0,1 mol/l Chlorwasserstoffsäure und 5,00 ml verdünnter Jodlösung und rühren Sie gut um.

4.Verwenden Sie eine Mischung aus 0,5 ml Chlorwasserstoffsäure 0,1 mol/L und 5,00 ml flüssiger Jodlösung als Reaktionsweiß und absorbieren Sie schnell (A) mit einem Würfel von 10 mm und einer Länge von 660 nm. Bitte konsultieren Sie nach der Aufnahme den Anhang A (geändert im QB-T-Standard 1803-93) und achten Sie auf die Konzentration (C) der enzymatischen Lösung.

Definition der Enzymaktivität:

1 ml flüssiges Enzym, 1 Stunde lang löslich bei 60 °C, pH = 6,0, ist eine Enzymaktivitätseinheit, ausgedrückt in U/ml.

rechnerisch:

X=C×n, Die erhaltenen Ergebnisse werden in zahlreichen Eingaben ausgedrückt.

Ergebnistoleranz:

Der relative Fehler der parallelen Experimente beträgt nicht mehr als 2 %.